健康食品功效篩選試驗

066 月 2022 by miya.lee@superlab.com.tw

根據衛生福利部公告之健康食品功效評估方法共有 13 項，台美檢驗可根據您的產品特性先以篩選預試驗，測試產品功效。經過預試驗後，再將有效劑量導入正式試驗中，依照各評估方法進行試驗，能增加實驗成功的機會。功效篩選試驗能夠協助您降低後續開發新產品及申請健字號之成本負擔與風險。

腸道菌相試驗

試驗	原理	規格
胃/膽酸耐受度試驗	益生菌於胃/膽酸環境耐受度愈高，代表益生菌能通過消化道環境，進而於腸道定殖。	◆ 益生菌經膽鹽、 NaCl 或酸性培養液培養。 ◆ MRS 培養基評估 2~24 小時菌數。
益生菌吸附力試驗 (Adhesion to Caco-2 Cells)	益生菌於腸道細胞吸附力愈高，代表益生菌停於體內駐留時間較久，提升定殖效率，改善腸道菌相。	◆ 1~3 個益生菌濃度或菌株。 ◆ 與 Caco-2 細胞共同培養 3 及 6 小時。 ◆ 評估益生菌於細胞吸附量。
抵抗病原菌感染試驗	益生菌通過調體內微生物的平衡，增殖有益細菌為優勢菌群，抑制有害細菌，改善腸道菌相。	◆ 1 株病原菌。 ◆ 1~3 個濃度或菌株。 ◆ 病原菌與益生菌共同培養後於 24~72 小時評估菌數。 ◆ 計算抑制率 (%)。
腸道上皮細胞屏障功能試驗	與抵抗病原菌感染試驗相同，益生菌通過調體內微生物的平衡，能夠改善腸道菌相。	◆ 1~3 個濃度或菌株與腸道上皮細胞共同培養。 ◆ 藉由導電度評估腸道上皮細胞屏障功能。 ◆ 計算抑制率 (%)。

調節免疫試驗

試驗	原理	規格
細胞激素分泌試驗	利用細胞模擬免疫調控，利用細胞激素表現篩選有潛力具調節免疫功效產品成份。	◆ 使用小鼠巨噬細胞株 Raw264 7。 ◆ 3~5 個濃度與細胞共同培養 24 小時。 ◆ LPS 誘導後，進行 3 種細胞激素分析(IL-1β, IL-6, TNF-α)。
NO 產生細胞試驗	與細胞激素分泌試驗相同，利用細胞激素表現篩選有潛力具調節免疫功效產品成份。	◆ 使用小鼠巨噬細胞株 Raw264 7。 ◆ 3~5 個濃度與細胞共同培養 24 小時。 ◆ LPS 誘導後，進行 3 種細胞激素分析(IL-1β, IL-6, TNF-α)。

調節過敏試驗

試驗	原理	規格
調節過敏功效細胞試驗	利用細胞模擬免疫調控，利用細胞激素表現篩選有潛力具調節過敏功效產品成份。	◆ 人類周邊血液單核球細胞 (hPBMC) 或小鼠巨噬細胞株 Raw264 7。 ◆ 3~5 個濃度與細胞共同培養 24 小時。 ◆ LPS 誘導後，進行 4 種細胞激素分析。

調節血糖試驗

試驗	原理	規格
葡萄糖攝取試驗	週邊組織攝入葡萄糖，對於血糖的恆定很重要的步驟，產品以 1~3 種細胞株評估葡萄糖攝取能力，篩選血糖調節功效之潛力產品。	◆ 3T3-L1 脂肪細胞、骨骼肌細胞株、肝臟細胞、胰島細胞株 RIN-m5F。 ◆ 3 個濃度與細胞共同培養 24 小時。 ◆ 加入 insulin 及 Glucose ，評估細胞葡萄糖吸收率。
胰島素分泌試驗	血糖的恆定依整 beta 細胞分泌胰島素調節，產品 beta 細胞株評估胰島素分泌量，篩選血糖調節功效之潛力產品。	◆ 大鼠胰島細胞株 RIN-m5F。 ◆ 3 個濃度與細胞共同培養 24 小時。 ◆ 分析上清 insulin 含量，評估細胞葡萄糖吸收率。

不易形成體脂肪試驗

試驗	原理	規格
脂肪細胞分化/增生抑制試驗	體脂率主要藉由脂肪細胞增生與增大而來，藉由脂肪細胞的生成與增生抑制試驗，篩選出不易形成體脂的潛力產品。	◆ 3T3-L1 細胞分化過程與產品共同培養 0~6 天。 ◆ 進行Oil Red O Staining，評估油滴形成以判斷產品抑制脂肪形成。
脂肪酸吸收試驗	與脂肪細胞分化/增生抑制試驗相同，藉由脂肪細胞的生成與增生抑制試驗，篩選出不易形成體脂的潛力產品。	◆ 3T3-L1 細胞分化過程與產品共同培養 0~6 天。 ◆ 評估脂肪酸吸收效率。

骨質保健試驗

試驗	原理	規格
骨形成細胞試驗	骨質疏鬆是由於骨形成作用與骨溶蝕作用失衡而造成骨質量減少的症狀，以「人骨肉瘤细胞 MG-63 」進行骨形成作用評估，以「小鼠巨噬細胞株 Raw264.7 」進行骨溶蝕作用評估，篩選潛力產品。	◆ 人骨肉瘤细胞 MG-63 與產品進行持續 14 天的共同培養。 ◆ 1~7 天可偵早期骨細胞分化指標 Runx2 mRNA 表現。 ◆ 14天可以茜素紅染色評估成熟骨細胞的形成。
蝕骨細胞形成試驗	以「人骨肉瘤细胞 MG-63 」進行骨形成作用評估，以「小鼠巨噬細胞株 Raw264.7 」進行骨溶蝕作用評估，篩選潛力產品。	◆ 小鼠巨噬細胞株 Raw264.7 於 RANKL 誘導下會分化成蝕骨細胞，將產品共同培養 7 天。 ◆ 進行 TRAP activity 評估蝕骨細胞形成情形。
成骨/蝕骨細胞吸收坑試驗	以「人骨肉瘤细胞 MG-63 」進行骨形成作用評估，以「小鼠巨噬細胞株 Raw264.7 」進行骨溶蝕作用評估，篩選潛力產品。	◆ 以小鼠巨噬細胞株 Raw264.7 及骨髓巨噬細胞 (BMM) 分別於 RANKL 及 M-CSF 誘導，並將產品共同培養 7 天，再進行吸收坑檢測，評估骨形成情形。

促進鐵可利用率

試驗	原理	規格
Caco-2 細胞攝鐵試驗	鐵生體可利用率包括吸收與利用，藉由 Caco-2/HT29 建構腸道膜式可篩選出促鐵吸收的潛力產品；人類血球細胞株可用以篩選出促鐵利用的潛力產品。	◆ Caco-2/HT29 共培養細胞模式 14 天後，加產品作用 1 小時。 ◆ 收集細胞總蛋白分析 ferritin 生成及 ferric reductase activity。
血基質生成試驗	與 Caco-2 細胞攝鐵試驗相同，藉由 Caco-2/HT29 建構腸道膜式可篩選出促鐵吸收的潛力產品；人類血球細胞株可用以篩選出促鐵利用的潛力產品。	◆ 人體血球細胞株Ｋ-562 處理產品約 4~5 天，收集細胞檢測 hemoglobin 含量。

調節血脂試驗

試驗	原理	規格
細胞脂質形成試驗	三酸甘油脂及膽固醇主要合成組織包括肝臟、脂肪組織、腸道黏膜、乳腺細胞與肌肉，以相關細胞株與產品共同培養進行脂肪滴評估篩選潛力產品。	◆ 3T3-L1、HepaG2、Caco-2 與產品共同培養 0~6 天。 ◆ 進行 Oil Red O Staining，評估油滴形成以判斷產品抑制脂肪形成。 ◆ 細胞進行脂質萃取定量含量。